10月1日,中國科學院深圳先進技術研究院生物醫(yī)學與健康工程研究所研究員楊慧團隊,與深圳市兒童醫(yī)院麻曉鵬、謝中建團隊合作,在《生物傳感器與生物電子學》上發(fā)表最新研究進展。該研究開發(fā)了一種基于CRISPR/Cas12a和等溫擴增技術(LOC-CRISPR)的簡單、全封閉、高度集成的微流控系統(tǒng),可以特異性識別多種常見呼吸道病毒及其變種。

呼吸道病毒是導致呼吸道感染的主要因素之一,包括冠狀病毒、流感病毒和呼吸道合胞病毒等。在兒童和老年人等高風險人群中,病毒感染導致的死亡率極高。傳統(tǒng)的診斷方法通常需要復雜的實驗設備和較長的檢測周期,且存在著高成本、低靈敏度等問題。此外,傳統(tǒng)的PCR技術只能確定病毒類型,如果要檢測同一病毒的不同變異株,就需要進行昂貴且耗時的基因測序。

為了解決上述問題,研究人員開發(fā)了一種名為LOC-CRISPR的新技術,它基于CRISPR/Cas12a和等溫擴增技術,是一種簡單、全封閉、高度集成的微流控系統(tǒng)。該系統(tǒng)可以對SARS-CoV-2(新冠病毒)及其變異株、H1N1(甲型流感病毒)、H3N2(甲型流感病毒)、IVB(流感病毒)和HRSV(呼吸道感染病毒)的進行精準識別。在臨床樣本測試中,研究團隊使用LOC-CRISPR芯片分析了50份鼻咽拭子樣本(44份陽性和6份陰性),并獲得了優(yōu)異的靈敏度(97.8%)和特異性(100%)。

該系統(tǒng)中,研究人員在LOC-CRISPR芯片中集成了核酸提取、核酸擴增和熒光檢測三個功能區(qū)。并且LOC-CRISPR芯片還設計了用于多重檢測(兩個樣本輸入和十個結果輸出)需求的特殊結構。該系統(tǒng)中的另一項關鍵技術是CRISPR/Cas12a技術,它是一種基于RNA導向的基因編輯技術,能夠通過特異性識別和切割DNA序列,具有高度特異性和高效率的特點。研究團隊利用CRISPR/Cas12a的導向作用,將其與等溫擴增技術相結合,減少檢測步驟,降低檢測時間,不僅實現了呼吸道病毒的種類識別,而且還實現了對新型冠狀病毒的不同變異株之間的堿基序列識別。

該研究有望實現將實驗室科學帶入社區(qū)診所,是診斷技術領域的一個重大突破。未來,隨著針對多種疾病診斷試劑的持續(xù)開發(fā),該款微流控芯片將在疾病預防、健康監(jiān)測以及個性化醫(yī)療方面,具有巨大的潛力和應用價值。

相關論文信息:https://doi.org/10.1016/j.bios.2023.115523

來源:中國科學報