據(jù)世界衛(wèi)生組織官網(wǎng)報道，超過全球人口的5%，即4.66億人患有致殘性聽力損失，其中3400萬是兒童。先天性耳聾的兒童，60%是遺傳因素所致，目前尚無可以治療的藥物。隨著基因編輯和基因治療技術的迅速發(fā)展，有望精準治愈遺傳性耳聾。

近日，美國基因和細胞治療學會(ASGT)的正刊Molecular Therapy在線發(fā)表了復旦大學附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院李華偉和舒易來團隊題為“Gene editing in a Myo6 semi-dominant mouse model rescues auditory function”（CRISPR/Cas9基因編輯治療Myo6顯性遺傳性耳聾）的論文。該研究以模擬Myo6遺傳性耳聾患者的顯性遺傳性耳聾小鼠模型為對象，利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)（SaCas9-KKH系統(tǒng)），針對突變位點（Myo6，c.1325G>A ，p.C442Y）篩選出了特異且高效編輯的gRNA2，然后利用高效感染內(nèi)耳毛細胞的腺相關病毒AAV-PHP.eB將SaCas9-KKH-Myo6-g2基因編輯治療體系遞送至Myo6^WT/C442Y耳聾小鼠模型的內(nèi)耳，實現(xiàn)了在體原位特異性敲除Myo6^C442Y突變等位基因，并在長達5個月的觀察期內(nèi)，均實現(xiàn)了明顯的聽覺功能恢復。這是國際上首個利用CRISPR/Cas9技術針對Myo6基因突變導致的遺傳性耳聾進行治療，并獲得成功的研究，是基因編輯技術用于遺傳性耳聾治療的重要研究進展，為遺傳性耳聾基因治療臨床轉(zhuǎn)化提供了堅實的科學依據(jù)。

Myo6基因的致病變異導致常染色體顯性或隱性遺傳性耳聾。據(jù)報道，2.4%的常染色體顯性遺傳感音神經(jīng)性耳聾病例是由Myo6突變引起的。Myo6?p.C442Y突變在人類中自兒童時期開始發(fā)生漸進性聽力損失。傳統(tǒng)的過表達的基因治療方法不適合于顯性遺傳性耳聾的基因治療，并且存在有效期不夠持久的可能。因此，亟需尋找一種有效針對基因Myo6 C442Y突變導致的半顯性遺傳感音神經(jīng)性聾的治療方法。

復旦大學附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院耳聾基因治療團隊聯(lián)合中國農(nóng)業(yè)科學院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所左二偉研究員，通過AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2基因編輯系統(tǒng)特異性地敲除Myo6 WT/C442Y小鼠中的Myo6 C442Y突變等位基因后，并在敲除后的5個月內(nèi)，觀察到聽覺功能的恢復，同時，還觀察到內(nèi)耳毛細胞存活率提高、纖毛形態(tài)變規(guī)則，電生理指標得到糾正。研究團隊同時進行了AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2體系的安全性評估，未發(fā)現(xiàn)明顯的脫靶情況，且對野生型小鼠的聽力沒有影響，驗證了該治療體系的安全性。

該工作通訊作者為李華偉教授，舒易來研究員、副主任醫(yī)師和左二偉研究員，眼耳鼻喉科醫(yī)院薛媛媛、王大奇博士后和中科院胡新德、中國農(nóng)業(yè)科學院李迪博士為論文的共同第一作者，眼耳鼻喉科醫(yī)院李耕林研究員合作指導完成電生理研究工作。眼耳鼻喉科醫(yī)院李華偉、舒易來團隊長期致力于感音神經(jīng)性聾的前沿科學創(chuàng)新性探索和臨床轉(zhuǎn)化，包括內(nèi)耳毛細胞再生、聽覺保護以及遺傳性耳聾基因治療的臨床轉(zhuǎn)化研究等。該研究創(chuàng)新性地以CRISPR/Cas9基因編輯治療MYO6基因突變導致的耳聾，為遺傳性耳聾的臨床轉(zhuǎn)化治療提供了理論基礎和實驗依據(jù)。

原文鏈接：https://www.cell.com/molecular-therapy-family/molecular-therapy/fulltext/S1525-0016(21)00321-X

來源：復旦大學上海醫(yī)學院