青島能源所等提出口腔根管沖洗液抑菌效能評(píng)價(jià)新技術(shù)
? ? ? ? 牙髓及根尖周組織內(nèi)的微生物感染可引起牙髓炎、根尖牙周炎甚至持續(xù)炎癥反應(yīng)。在口腔根管治療過(guò)程中,根管沖洗液種類(lèi)和濃度的選擇至關(guān)重要。
近日,中國(guó)科學(xué)院青島生物能源與過(guò)程研究所、青島市市立醫(yī)院將重水標(biāo)記單細(xì)胞拉曼技術(shù)(D2O-SCRS)首次應(yīng)用于根管沖洗液抑菌效能的評(píng)價(jià)中,捕捉到病原體已經(jīng)停止生長(zhǎng)但仍舊代謝活躍的狀態(tài),從而以“能夠完全抑制代謝”作為新的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)篩選抑菌劑的種類(lèi)、濃度和組合。這不僅能減少感染的復(fù)發(fā)和難治性根尖周炎的發(fā)生概率,還能確定根管沖洗液的最優(yōu)配方或最高效使用方式,以降低藥物副作用,達(dá)到口腔精準(zhǔn)用藥的目的。該新技術(shù)適用于所有消毒與抑菌產(chǎn)品的效能評(píng)價(jià)。
在口腔根管治療中,機(jī)械清創(chuàng)不能完全去除根管表面的生物膜,還需輔以根管沖洗抑菌液以確保管間交通支、副根管等器械不易到達(dá)部位的徹底清創(chuàng),是根管治療的一個(gè)重要步驟,也是最終根管治療成功的關(guān)鍵。理想的根管沖洗液應(yīng)能有效控制病原體、溶解殘余牙髓組織和玷污層,并且無(wú)毒、不致敏,然而這些理想的特征往往是相斥的。同時(shí),由于缺乏快速準(zhǔn)確評(píng)估根管沖洗抑菌液對(duì)感染微生物影響的方法,臨床根管治療過(guò)程中根管沖洗抑菌液的類(lèi)型、濃度、持續(xù)時(shí)間或組合的選擇往往是基于經(jīng)驗(yàn)。因此,迫切需要開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)便且快速的檢測(cè)技術(shù),能夠?qū)崟r(shí)追蹤不同配比沖洗液處理下口腔微生物的代謝抑制狀態(tài),進(jìn)而指導(dǎo)臨床根管治療。
針對(duì)以上瓶頸問(wèn)題,該研究使用青島能源所研制的國(guó)內(nèi)外首臺(tái)“臨床單細(xì)胞拉曼藥敏快檢儀”(CAST-R),分別以白色念珠菌(真菌)和糞腸球菌(細(xì)菌)等常見(jiàn)根管感染微生物為模式菌株,通過(guò)重水飼喂單細(xì)胞拉曼藥敏快檢技術(shù),評(píng)估單細(xì)胞精度的細(xì)菌代謝活性狀態(tài),從而分析和測(cè)定三種常用的根管沖洗抑菌液(次氯酸鈉、過(guò)氧化氫或葡萄糖酸氯己定)的抑菌程度,進(jìn)而指導(dǎo)臨床用藥選擇,篩選更有效且副作用小的根管沖洗抑菌液濃度和配比。
目前評(píng)估抗菌劑療效通?;谧钚∫志鷿舛龋∕IC)。在MIC劑量下,盡管細(xì)胞生長(zhǎng)停止,但仍然存在代謝活動(dòng),處于這種“非生長(zhǎng)但代謝活躍”(NGMA)狀態(tài)的病原菌仍可能導(dǎo)致潛在的復(fù)發(fā)性感染。對(duì)此,科研人員使用CAST-R,測(cè)量了不同試劑的MIC-MA,即基于代謝活性的最低抑菌濃度,在MIC-MA劑量下,所有微生物細(xì)胞的代謝活動(dòng)完全停止。此外,研究發(fā)現(xiàn),不同根管沖洗液的更低濃度(即未達(dá)到MIC-MA濃度)聯(lián)合用藥,可達(dá)到與單一沖洗液MIC-MA劑量用藥相當(dāng)?shù)拇x抑制作用。由于每種根管沖洗液濃度越低,副作用就越少,因此聯(lián)合應(yīng)用更有效、更安全。
綜上所述,CAST-R儀器和MIC-MA指數(shù)可為根管沖洗液的定量評(píng)價(jià)、治療方案的合理篩選和抑菌藥物的準(zhǔn)確應(yīng)用提供普遍適用的解決方案,普遍適用于真菌、細(xì)菌等微生物。此外,基于前期開(kāi)發(fā)的表征細(xì)胞應(yīng)激特異性反應(yīng)的RBCS(細(xì)胞應(yīng)激拉曼條形碼),該研究還推導(dǎo)出口腔致病微生物-沖洗液的時(shí)間特異性反應(yīng)條形碼。相較于傳統(tǒng)的單細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)分析方法如形態(tài)學(xué)分析、熒光生物傳感器或轉(zhuǎn)錄組分析,RBCS具有單細(xì)胞精度快速、無(wú)標(biāo)記、無(wú)損評(píng)價(jià)每種刺激物特異細(xì)胞反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),代表著一種患者個(gè)性化、低成本的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)全景視圖,具有臨床應(yīng)用前景。
相關(guān)成果發(fā)表于《細(xì)胞與感染微生物學(xué)前沿》(Frontiers in Cellular and Infection Microbiology)和《拉曼光譜學(xué)》(Journal of Raman Spectroscopy)。研究得到國(guó)家自然科學(xué)基金委、中科院等支持。

基于重水飼喂單細(xì)胞拉曼的CAST-R為消毒與抑菌產(chǎn)品的效能評(píng)價(jià)提供新方法
來(lái)源: 青島生物能源與過(guò)程研究所


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